不同细胞对乙型脑炎病毒蚀斑减少中和试验的

不同细胞对乙型脑炎病毒蚀斑减少中和试验的影响

摘要：

目的分别使用不同细胞测定乙型脑炎病毒（Japaneseencephalitisvirus，JEV）滴度及乙型脑炎灭活疫苗效价，分析不同细胞对检测结果的影响。

方法将JEVP3株接种至长满单层的MDBK、Vero、LLC-MK2、BHK-21细胞的6孔板，采用蚀斑试验测定JEV的PFU；将型脑炎灭活疫苗（Vero细胞）免疫小鼠，取静脉血，分离血清，经56益灭能30min后，与JEVP3株混合，接种至长满单层的Vero、BHK-21、LLC-MK2细胞的6孔板，采用蚀斑减少中和试验检测乙型脑炎灭活疫苗的效价。

结果JEV在4种细胞上均可产生细胞病变（cytopathiceffect，CPE），但在MDBK细胞上不形成蚀斑，病毒感染的Vero、LLC-MK2、BHK-21细胞的收获液病毒滴度分别为10.02、9.42和9.21lgPFU/ml；3种细胞测定乙型脑炎灭活疫苗效价T值VeroLLC-MK2BHK-21，其中Vero细胞与BHK-21和LLC-MK2细胞比较，蚀斑减少率及对应T值差异有统计学意义（P0.05），LLC-MK2与BHK-21细胞比较，蚀斑减少率及对应T值差异无统计学意义（P0.05）。

结论4种细胞感染JEV后均可产生CPE，但MDBK细胞不能形成蚀斑；不同细胞测定疫苗效价，蚀斑减少率及对应T值也不同，其中Vero细胞测定T值最大，BHK-21细胞测定T值最小。

关键词：乙型脑炎病毒；蚀斑试验；BHK-21细胞；Vero细胞；LLC-MK2细胞；MDBK细胞

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